GE 試劑 細胞分離液Percoll

GE 試劑 細胞分離液Percoll 17-0891-09

原理

ELISA是以免疫學(xué)反應為基礎，將抗原、牽9體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。由于抗原、抗體的反應在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行，每加入一種試劑孵育后，可通過(guò)洗滌除去多余的游離反應物，從而保證試驗結果的特異性與穩定性。在實(shí)際應用中，通過(guò)不同的設計，具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測抗體的間接法(圖a)、用于檢測抗原的雙抗體夾心法(圖b)以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法。

ELISA中常見(jiàn)問(wèn)題及解決方法

ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在臨床上得到了廣泛的應用，但操作中的各個(gè)環(huán)節對試驗的檢測效果影響較大，如不注意，有可能導致顯色不全、花板等結果。我將操作中各個(gè)環(huán)節常出現問(wèn)題的原因及解決辦法總結于下，以期給同行帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗質(zhì)量。

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•  在溫和的條件下，分離細胞、亞細胞結構和較大的病毒分子（可小至~70S），保持其存活和形態(tài)的完整性

 •  對細胞無(wú)毒性

 •  可調整到生理狀態(tài)下的離子強度和pH

 •  使用角轉頭，以中速離心，即可形成梯度

 •  等滲梯度，密度zui大可達到1.3 g/ml。

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Percoll為低粘度的密度梯度介質(zhì)，用于分離細胞、亞細胞結構和較大的病毒分子。粘度低，因此使用低的離心力（200-1000× g），只需幾分鐘就可形成梯度對細胞進(jìn)行分離。Percoll供貨時(shí)已經(jīng)消毒，并且易于再次消毒。包裝于易打開(kāi)，并可再次密封的250ml和1升瓶中。

* 注意：僅限于體外研究

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